Colorimetriese metode - 'n analise gebaseer op 'n vergelyking van die kleurversadiging van die ondersoek en bekende stowwe. Die resultate van fisiese en chemiese toetse is van groot waarde vir baie vertakkings van die wetenskap, maar die navorsing word veral in die geneeskunde gebruik.
Die kern van die kolorimetriese metode
Daar is baie soorte toetse wat die chemiese samestelling van stowwe bepaal. Sommige van hulle is universeel en word wyd gebruik in verskeie velde, ander is spesifiek, met hoër akkuraatheid. Die kolorimetriese metode is universeel.
Die kern van die analise lê daarin dat die kleurversadiging van 'n oplossing met 'n onbekende konsentrasie vergelyk word met die kleur van 'n standaardoplossing. Tydens die analise, as gevolg van die interaksie van die ondersoek komponent met 'n sekere reagens, word 'n gekleurde verbinding gevorm. Na voltooiing van die reaksie word die resulterende skakering vergelyk met die kleur van die oplossings waarvan die konsentrasie reeds bekend is.
Daar word geglo dat die stigter van kolorimetrie Robert Boyle is. Hy het squeeze gebruiktanniene om yster van koper in oplossing te onderskei. Dit was Boyle wat opgemerk het dat hoe groter die konsentrasie yster in die oplossing is, hoe ryker is die toon van laasgenoemde.
Colorimetrie
Colorimetrie is 'n metode om die hoeveelheid van 'n stof in oplossings te bepaal. Die ontleding is gebaseer op die Bouguer-Lambert-Beer-wet: wanneer 'n ligstraal 'n digte absorberende laag van 'n stof tref, verswak die intensiteit daarvan.
Die kolorimetriese metode vir die bepaling van die konsentrasie van 'n stof kan 'n visuele vergelyking of vergelyking gebruik deur spesiale instrumente te gebruik om kleurintensiteit te meet. Die vergelyking word op 'n direkte en kompenserende manier gemaak.
- Reguit. Die metode behels die vergelyking van die kleurvlak van die toetsoplossing by 'n sekere digtheid en temperatuur van die vloeistof met 'n verwysingsoplossing. Wanneer fotokolorimeters en spektrofotometers gebruik word, word gedistilleerde water as verwysingsoplossing gebruik. Die toestelle meet die intensiteit van die stroom, wat afhang van die intensiteit van die lig.
- Vergoedend. Die metode is daarop gebaseer om die kleur van die bestudeerde monster na die verwysing een te bring. Die resultaat word verkry deur 'n oplosmiddel by te voeg of die hoogte van die laag van die gekleurde medium te verhoog.
Die gebruik van 'n spektrofotometer, monochromator en ander presisie-instrumente vereenvoudig die reeds eenvoudige metode van navorsing verder en laat jou toe om die akkuraatheid van die resultate te verhoog. Hierdie toestelle is in staat om die hoeveelheid ligtransmissie te meet en die golflengte te bepaal.
Waar ontleding toegepas word
Colorimetriese metode van ontleding word gebruik wanneer die presiese chemiese samestelling bekend is, daar 'n verwysingsmonster is vir vergelyking, en die temperatuur van die toets en verwysingmonster dieselfde is. As jy vinnig die hoeveelheid van 'n gekleurde stof moet bepaal, maar dit is so klein dat dit onmoontlik is om die analitiese metode toe te pas.
Colorimetrie word wyd gebruik in medisyne vir kliniese biochemiese navorsing en ander gebiede:
- farmaseutiese industrie;
- voedsel- en alkoholbedryf;
- agronomie (bepaling van grondkwaliteit).
Voor- en nadele
Die kolorimetriese metode, soos enige ander, het voor- en nadele.
Die voordele sluit die volgende in:
- gemak van ontleding, minimum voorbereidende prosedures;
- moontlikheid om te toets, selfs met 'n klein hoeveelheid toetsmateriaal;
- daar is geen behoefte aan duur toerusting nie, hoewel moderne toestelle wat nie goedkoop is nie die afgelope tyd toenemend gebruik word. Maar hulle verskaf die akkuraatste resultaat.
Nadele: lae akkuraatheid van analise in vergelyking met analitiese metodes.
Biureetmetode vir proteïenbepaling
Proteïen in bloedserum is 'n aanduiding wat die toestand van homeostase weerspieël. 'n Toename in die konsentrasie van 'n makromolekulêre verbinding in die bloed word hiperproteïenemie genoem, 'n lae inhoud word hipoproteïenemie genoem.
Proteïene inbloedserum het 'n ander samestelling, struktuur, eienskappe, voer verskillende funksies uit. Hulle word verdeel in ensieme, hormone, immunoglobuliene en ander. Alle groepe proteïene het 'n aantal gemeenskaplike kenmerke, op grond waarvan metodes ontwikkel is vir die bepaling van makromolekulêre organiese verbindings in biologiese vloeistowwe.
Van al die metodes in kliniese biochemie, word kolorimetriese metodes vir die bepaling van proteïen die meeste gebruik. Hulle is relatief goedkoop, wat belangrik is vir begrotingsorganisasies. en is redelik eenvoudig. Die mees algemene is die biureetmetode. Die kern van die metode: proteïene in 'n alkaliese omgewing reageer met kopersulfaat en vorm pers verbindings. Die proteïeninhoud in die bloed word bepaal deur die versadiging van die kleuring. Biomateriaal vir ontleding word soggens op 'n leë maag geneem.
Die ontleding is hoogs akkuraat, maar daar is faktore wat die konsentrasie proteïen in die bloed beïnvloed:
- fisiese aktiwiteit kort voor biomateriaalmonsterneming;
- laaste weke van swangerskap en laktasie;
- die gebruik van die middels Corticotropin, Miscleron, Clofibrate verhoog die proteïeninhoud in die bloed, en die gebruik van Pyrazinamide en estrogeen - om die konsentrasie te verminder;
- verkeerde handposisie tydens biomateriaalmonsterneming.
Bepaling van yster
Die hoeveelheid yster in die bloed is een van die hoofaanwysers in die diagnose van verskeie siektes. Die stof is gekonsentreer in hemoglobien, wat die vervoer van suurstof na die weefsels verseker. Virbepaling van yster deur die kolorimetriese metode, meestal word 'n oplossing van bathofenantrolien (0,02%) as hoofreagens gebruik. Biomateriaal - serum sonder spore van hemolise.
Die kern van die metode: die interaksie van ysterhoudende ione en gesulfateerde bathofenantrolien vorm 'n gekleurde kompleks, waarvan die versadiging fotometries bepaal word. Om 'n duidelike oplossing te verkry, is dit nodig om die reëls vir die monsterneming van die biomateriaal te volg, maar om die optiese digthede van yster-ligand komplekse akkuraat te bepaal, word yster vrygestel uit hemoglobien met behulp van hidroksielamien en skoonmaakmiddels (natriumdodesielsulfaat). Die toetsuitslag bepaal die teenwoordigheid en graad van patologie. Normale ysterkonsentrasie moet: wees
- 14, 2 – 26,0 µmol/L (mans);
- 10, 6- 21, 7 µmol/L (vroue).
Ystertekort word gewoonlik geassosieer met bloedverlies, onvoldoende dieetinname of swak absorpsie vanaf die spysverteringskanaal.
Cholesteroltoets
Cholesterol is 'n organiese stof wat in die selwande van baie organismes, insluitend mense, voorkom. Dit is nodig vir die produksie van cholecalciferol en steroïedhormone. 'n Cholesterolvlak van 3,37-5,2 mmol/L word as normaal beskou. Verhoogde inhoud is een van die hoofoorsake van aterosklerose.
Colorimetriese metodes vir die bepaling van cholesterol stel jou in staat om vaskulêre siektes op 'n vroeë stadium te herken. Volgens patoanatomiese resultate in dodelike uitkoms van iskemie, die konsentrasie van lipofiele alkohol in pasiëntewas 6,5-7,8 mmol/L.
Die beginsel van die kolorimetriese metode is dat cholesterol geoksideer word deur 3beta-hidroksi-steroïed-oksidoreduktase, wat waterstofperoksied vrystel, wat p-aminoatipirien in 'n gekleurde verbinding omskakel. Die inhoud van cholesterol word bepaal deur die versadiging van sy kleur.
Wanneer 'n toets by 'n kind gedoen word, moet in ag geneem word dat die konsentrasie van cholesterol in die kinderjare nie 4,1 mmol / l moet oorskry nie.
Wat is die ensiematiese kolorimetriese metode?
Ensiematiese toetse is gebaseer op die gebruik van reaksies deur ensieme met hoë aktiwiteit. Hulle word wyd in analitiese chemie gebruik om verskeie stowwe te bepaal - van nitraatione tot makromolekules.
Ensiematiese (ensiematiese) metodes is spesifiek, wat die ontleding van sekere stowwe in die teenwoordigheid van ander stowwe soortgelyk in samestelling moontlik maak. Die mees algemene metodes gebaseer op die gebruik van die ensiem - glukose-oksidase. Die toets word gebruik om die konsentrasie van glukose in die bloed te bepaal. Die akkuraatheid van die toets laat dit toe om die dosis hipoglisemiese middels by pasiënte met tipe 2-diabetes aan te pas.
Glukose-oksidantmetode word beskou as een van die beste kwantitatiewe metodes om glukose te bepaal. Beide bloed (kapillêre) en serum kan as 'n biomateriaal gebruik word, maar plasma is meer verkieslik omdat dit 'n laer hematokritinhoud het, wat die akkuraatheid van die resultaat negatief beïnvloed.
Die kinetiese metode van fotometrie word hoofsaaklik gebruik. Die essensie daarvan lê in die feit datdie vasgestelde verhouding van glukose-oksidase en peroksidase, vir 'n sekere tyd na die aanvang van die reaksie, sal die tempo van vorming van 'n gekleurde verbinding ooreenstem met die vlak van glukose in die monster. Die grootste voordeel van die toets is dat die resultaat nie beïnvloed word deur die teenwoordigheid van derdeparty-verbindings in die monster nie. Die metode het ook 'n nadeel - duur meetinstrumente van Duitse of Sweedse vervaardigers word vir die toets benodig.
Gevolgtrekking
Die kolorimetriese metode is akkuraat en maklik om te gebruik. Die gebruik daarvan in medisyne laat vroeë opsporing van verskeie patologiese veranderinge in die liggaam toe. Met die bekendstelling van nuwe tegnologieë word die metode verbeter en word dit al hoe meer gewild.
