Die studie van bakterieë is van groot praktiese belang vir mense. Tot op hede is 'n groot aantal prokariote ontdek, wat van mekaar verskil in patogeniteit, verspreidingsarea, vorm, grootte, aantal flagella en ander parameters. Om hierdie stam in detail te bestudeer, word 'n bakteriologiese navorsingsmetode gebruik.
Wat is die metodes vir die ontleding van bakteriese selle?
Om te bepaal of bakterieë patogenies is, word die kultuur op verskeie maniere ondersoek. Onder hulle:
1. Bakterioskopiese metode.
2. Bakteriologiese metode.
3. Biologiese metode.
Bakterioskopiese en bakteriologiese navorsingsmetodes is direk gebaseer op werk met prokariotiese selle, wanneer biologiese analise nodig is om die effek van sulke selle op die lewende organisme van proefdiere te bestudeer. Volgens die mate van manifestasie van sekere tekens van die siekte, kan die wetenskaplike maakgevolgtrekking oor die aan- of afwesigheid van patogene bakterieë in die monster, asook om dit natuurlik in die dier se liggaam voort te plant om hul kultuur te verkry en in ander werke te gebruik.
Die bakteriologiese metode van navorsing verskil van bakterioskopies. In die eerste word 'n spesiaal voorbereide kultuur van lewende prokariote vir ontleding gebruik, terwyl in die tweede gewerk word met dooie of lewende selle op 'n glasskyfie.
Stadiums van die bakteriologiese navorsingsmetode. Mikrobiologie
Die beginsel om die eienskappe van 'n bakteriese kultuur te bestudeer kan nuttig wees vir beide mikrobioloë wat die doelwit gestel het om prokariotiese selle te bestudeer, en vir laboratoriumtegnici wie se taak is om die patogenisiteit of nie-patogenisiteit van bakterieë te bepaal, en diagnoseer dan die pasiënt.
Die metode om bakterieë te bestudeer word in drie fases verdeel:
1. Isolasie van bakterieë van die oorspronklike monster.
2. Saai bakterieë en kweek 'n suiwer kultuur, bestudeer die eienskappe daarvan.
3. Gedetailleerde studie van bakteriese selle.
Eerste stadium
Die monster, of smeer, word van die vrye oppervlak van die medium of van die pasiënt geneem. So kry ons 'n "cocktail" van baie soorte bakterieë wat op 'n voedingsmedium gesaai moet word. Soms word dit moontlik om die nodige bakterieë onmiddellik te isoleer, met die kennis van hul verspreidingsfokuspunte in die liggaam.
Na twee of drie dae word die gewenste kolonies gekies enword met behulp van 'n steriele lus op vaste media van Petri-skottels gesaai. Baie laboratoriums werk met proefbuise, wat 'n vaste of vloeibare voedingsmedium kan bevat. Dit is hoe die bakteriologiese metode van navorsing in mikrobiologie uitgevoer word.
Tweede stadium
Na verkryging van individuele kolonies van bakterieë, word 'n direkte makro- en mikro-analise uitgevoer. Alle parameters van die kolonies word gemeet, die kleur en vorm van elkeen van hulle word bepaal. Dit is nie ongewoon om kolonies op 'n Petri-skottel en dan in die beginmateriaal te tel nie. Dit is belangrik in die ontleding van patogene bakterieë, waarvan die aantal afhang van die graad van die siekte.
Bakteriologiese metode van navorsing, waarvan die 2de stadium is om individuele kolonies van mikroörganismes te bestudeer, kan geassosieer word met 'n biologiese metode vir die ontleding van bakterieë. Nog 'n doelwit van werk op hierdie stadium is om die hoeveelheid bronmateriaal te verhoog. Dit kan op 'n voedingsmedium gedoen word, of jy kan 'n eksperiment in vivo op lewende eksperimentele organismes uitvoer. Patogeniese bakterieë sal vermeerder, en gevolglik sal die bloed miljoene prokariotiese selle bevat. Dit is maklik om die nodige werkmateriaal van bakterieë uit die bloed wat geneem is, voor te berei.
Derde fase
Die belangrikste deel van die studie is die bepaling van die morfologiese, biochemiese, toksige en antigeniese eienskappe van die bakteriese kultuur. Werk word uitgevoer met vooraf skoongemaakte kulture op 'n voedingsmedium, asook met preparate (dikwels gekleur) onder 'n mikroskoop.
Stel eienaarskappatogene of opportunistiese bakterieë aan een of ander sistematiese groep, sowel as om hul weerstand teen dwelms te bepaal, laat die bakteriologiese metode van navorsing toe. Stadium 3 - antibiotika, dit wil sê ontleding van die gedrag van bakteriële selle in die toestande van die inhoud van dwelms in die omgewing.
Die studie van antibiotika-weerstandigheid van 'n kultuur is van groot praktiese belang wanneer dit nodig is om die nodige, en die belangrikste, doeltreffende middels vir 'n spesifieke pasiënt voor te skryf. Dit is waar die bakteriologiese navorsingsmetode kan help.
Wat is 'n groeimedium?
Vir ontwikkeling en voortplanting moet bakterieë in voorafbereide voedingsmedia wees. Volgens konsekwentheid kan hulle vloeibaar of solied wees, en volgens oorsprong - groente of dier.
Basiese mediavereistes:
1. Steriliteit.
2. Maksimum deursigtigheid.
3. Optimale aanwysers van suurheid, osmotiese druk, wateraktiwiteit en ander biologiese waardes.
Verkryging van geïsoleerde kolonies
1. Drygalsky metode. Dit bestaan uit die feit dat 'n smeer met verskeie tipes mikroörganismes op die bakteriële lus toegedien word. Hierdie lus word met 'n voedingsmedium langs die eerste Petri-bak gevoer. Verder, sonder om die lus te verander, word die metode van oorblywende materiaal op die tweede en derde Petri-skottels uitgevoer. Dus, op die laaste monsters van die kolonie, sal die bakterieë nie te dig gesaai word nie, wat die vermoë vereenvoudig om die nodige vir werk te vind.bakterieë.
2. Koch metode. Dit gebruik proefbuise met gesmelte voedingsmedium.’n Lus of pipet met’n smeer van bakterieë word daar geplaas, waarna die inhoud van die proefbuis op’n spesiale bord gegooi word. Agar (of gelatien) stol na 'n rukkie, en dit is maklik om die gewenste selkolonies in sy dikte te vind. Dit is belangrik om die mengsel van bakterieë in proefbuise te verdun voordat met werk begin word sodat die konsentrasie mikroörganismes nie te hoog is nie.
Die bakteriologiese navorsingsmetode, waarvan die stadiums gebaseer is op die isolasie van die verlangde kultuur van bakterieë, kan nie sonder hierdie twee metodes vir die vind van geïsoleerde kolonies klaarkom nie.
Antibiogram
Visueel kan die reaksie van bakterieë op dwelms op twee praktiese maniere gesien word:
1. Papierskyfmetode.
2. Teel bakterieë en antibiotika in 'n vloeibare medium.
Die papierskyfmetode vereis 'n kultuur van mikroörganismes wat op 'n vaste voedingsmedium gekweek is. Op so 'n medium sit 'n paar stukkies geronde papier wat in antibiotika geweek is. As die geneesmiddel die neutralisering van bakteriële selle suksesvol hanteer, sal daar na sulke behandeling 'n gebied sonder kolonies wees. As die reaksie op die antibiotika negatief is, sal die bakterieë oorleef.
In die geval van die gebruik van 'n vloeibare voedingsmedium, berei eers verskeie proefbuise voor met 'n kultuur van bakterieë van verskillende verdunnings. Antibiotika word by hierdie proefbuise gevoeg, en die proses van interaksie tussen die stof en mikroörganismes word gedurende die dag waargeneem. As gevolg hiervan word 'n antibiogram van hoë geh alte verkry, waarvolgens dit moontlik is ombeoordeel die doeltreffendheid van die middel vir 'n gegewe gewas.
Belangrikste take van analise
Hier lys die doelwitte en stadiums van die bakteriologiese metode van navorsing.
1. Verkry die beginmateriaal wat gebruik sal word om bakteriese kolonies te isoleer. Dit kan 'n smeer van die oppervlak van enige voorwerp, slymvlies of holte van 'n menslike orgaan wees, 'n bloedtoets.
2. Kweek van kultuur op 'n vaste voedingsmedium. Na 24-48 uur kan kolonies van verskillende tipes bakterieë op die Petri-skottel gevind word. Ons kies die gewenste een volgens morfologiese en/of biochemiese kriteria en voer verdere werk daarmee uit.
3. Voortplanting van die resulterende kultuur. Die bakteriologiese navorsingsmetode kan gebaseer wees op 'n meganiese of biologiese metode om die aantal bakteriese kulture te verhoog. In die eerste geval word gewerk met vaste of vloeibare voedingsmedia, waarop bakterieë in 'n termostaat vermeerder en nuwe kolonies vorm. Die biologiese metode vereis natuurlike toestande om die aantal bakterieë te verhoog, so hier word die proefdier met mikroörganismes besmet. Na 'n paar dae kan baie prokariote in 'n bloedmonster of smeer gevind word.
4. Werk met gesuiwerde kultuur. Om die sistematiese posisie van bakterieë te bepaal, sowel as hul behoort aan patogene, is dit nodig om 'n deeglike ontleding van selle te doen volgens morfologiese en biochemiese eienskappe. Wanneer patogeniese groepe mikroörganismes bestudeer word, is dit belangrik om te weethoe effektief is antibiotika.
Dit was 'n algemene kenmerk van die bakteriologiese navorsingsmetode.
Kenmerke van die analise
Die hoofreël van bakteriologiese navorsing is maksimum steriliteit. As jy met proefbuise werk, moet kulture en herkulture van bakterieë slegs oor 'n verhitte spiritus-lamp uitgevoer word.
Alle stadiums van die bakteriologiese navorsingsmetode vereis die gebruik van 'n spesiale lus of 'n Pasteur-pipet. Albei gereedskap moet vooraf in die vlam van 'n alkohollamp behandel word. Wat die Pasteur-pipet betref, hier, voor termiese sterilisasie, is dit nodig om die punt van die pipet met 'n pincet af te breek.
Die tegniek om bakterieë te saai het ook sy eie kenmerke. Eerstens, wanneer daar op vaste media ingeënt word, word 'n bakteriese lus oor die oppervlak van die agar gevoer. Die lus moet natuurlik reeds 'n monster van mikro-organismes op die oppervlak hê. Inenting in die kultuurmedium word ook geoefen, in welke geval die lus of pipet die onderkant van die Petri-bak moet bereik.
Wanneer daar met vloeibare media gewerk word, word proefbuise gebruik. Hier is dit belangrik om te verseker dat vloeistowwe nie aan die rande van laboratoriumglasware of -stoppe raak nie, en die instrumente wat gebruik word (pipet, lus) nie aan vreemde voorwerpe en oppervlaktes raak nie.
Die belangrikheid van die biologiese navorsingsmetode
Bakteriemonsterontleding het sy praktiese toepassings. Hoofsaaklikbakteriologiese navorsingsmetode kan in medisyne gebruik word. Dit is byvoorbeeld nodig om die mikroflora van die pasiënt te bestudeer om die korrekte diagnose vas te stel, sowel as om die korrekte verloop van behandeling te ontwikkel. 'n Antibiogram help hier, wat die aktiwiteit van middels teen die patogeen sal wys.
Analise van bakterieë word in die laboratorium gebruik om gevaarlike siektes soos tuberkulose, herhalende koors of gonorree op te spoor. Dit word ook gebruik om die bakteriese samestelling van die mangels, orgaanholtes te bestudeer.
Bakteriologiese navorsingsmetode kan gebruik word om die kontaminasie van die omgewing te bepaal. Volgens die data oor die kwantitatiewe en kwalitatiewe samestelling van 'n smeer vanaf die oppervlak van 'n voorwerp, word die graad van bevolking van hierdie omgewing deur mikroörganismes bepaal.
