Hepatitis C is 'n infeksie van die lewer wat veroorsaak word deur die Flaviviridae HCV-virus, wat uit een of meer RNA-molekules bestaan. As 'n reël word 'n reeks diagnostiese maatreëls getref om hepatitis C by 'n pasiënt vas te stel. PCR is 'n analise wat die diagnose akkuraat bevestig. Dikwels word die gevolgtrekking deur dokters verskaf wanneer die pasiënt reeds die eerste tekens van die siekte het.
Wat is hepatitis C
Lewerskade deur 'n virusinfeksie wat deur bloed of seksuele kontak oorgedra word, word in medisyne hepatitis C genoem. Die veroorsakende middel is 'n RNA-bevattende virus van nie-sellulêre aansteeklike middels van die Flaviviridae-familie. Die infeksie kan lank in die liggaam bly sonder om homself te wys. Daarom, slegs wanneer 'n mikro-organisme opgespoor word met 'n bloedtoets wat PCR RNA RNA gebruik, word hepatitis C (as 'n diagnose) as geregverdig beskou.
Flavivirus word nie in kunsmatig gekweekte geïsoleerde selle geproduseer nie. In die proses van voortplanting skep die aansteeklike middel immunologies duidelike modifikasies. Hierdie faktore verhoed dat die liggaam geetoepaslike beskermende reaksie, en kenners sukkel om 'n doeltreffende entstof te ontwikkel.
Die virus word parenteraal oorgedra. Vir infeksie moet dit in voldoende hoeveelhede direk in die bloedstroom ingaan.
Watter toetse word vir hepatitis C gedoen
Virale patologieë van die lewer word gediagnoseer met behulp van laboratoriumtoetse. Kliniese studies van hepatitis C word uitgevoer deur vreemde en gevaarlike antigene of proteïenverbindings (teenliggaampies) in die pasiënt se biomateriaal, hoofsaaklik in die bloed, te bestudeer.
- Ensiematiese immuuntoets (ELISA). Die metode is gebaseer op die opsporing van lgM-teenliggaampies in die bloed. Immunoglobulien word as die grootste beskou en is 'n pentameer. Dit manifesteer hom in die primêre beskermende reaksie van limfosiete op 'n onbekende vreemde stof.
- Radioimmunoassay (RIA) - kwantitatiewe bepaling van lgM immunoglobulien deur gebruik te maak van 'n gemerkte radioaktiewe isotoop van jodium.
- PCR van hepatitis C - bepaling van virale RNA in die biomateriaal (bloed). Hierdie ontleding bevestig die diagnose betroubaar.
IgG-toets is nie betroubaar nie. Die teenwoordigheid daarvan in die bloedserum kan nie net die teenwoordigheid van 'n flavivirus aandui nie, maar ook 'n ander vorige infeksie wat dieselfde patogeen het.
Wat bepaal PCR-analise
Polymerase-kettingreaksie (PCR) is gebaseer op die identifikasie van DNA-streke spesifiek vir sekere patogene in monsters van materiaal vir navorsing (epiteel, bloed). Die ontleding maak dit moontlik om patogeniese kleinste organismes (virusse) te identifiseer deur hul RNA of DNA in biologiese materiaal op te spoor.
Laboratoriumprosedure vir die opsporing van teenliggaampies Hepatitis C PCR word in 3 stadiums uitgevoer:
- Kies. Die bestudeerde biomateriaal word van onsuiwerhede gesuiwer en DNA word in die mobiele fase van die chromatografiese kolom verkry.
- Versterking. Die ontleding word in die toestel-termostaatfietsryer uitgevoer. Dit verhit en verkoel die proefbuise met 'n sekere siklisiteit. Vir een studie word tot 35 siklusse uitgevoer. Die resultaat is 'n voldoende aantal DNS-fragmente om die patogeen op te spoor, te identifiseer en te evalueer.
- Elektroforese. Die resulterende fragmente word in 'n gel met verskillende versadiging van agarose geplaas en elektroforese word uitgevoer. Die resulterende elektroferogram word op 'n rekenaar ontleed.
Nie net die standaard PCR-studie word gebruik nie, maar ook die Real Time PCR-analise. Dit is intydse diagnostiek. Die metode maak voorsiening vir kwalitatiewe en kwantitatiewe analise, wat dit moontlik maak om die vorming en dinamika van die siekte te identifiseer, asook om terapie voor te skryf wat daarop gemik is om die oorsaak van die oorsprong van die patologie uit te skakel. Intydse PCR word ook gebruik om 'n suiwer kultuur van aansteeklike middels (genotipering) te bepaal.
Hoe word die polimerase-kettingreaksietoets gedoen
Vir diagnose kan enige menslike biologiese vloeistof gebruik word. Biomateriaal vir toetsing vir hepatitis C is gewoonlik bloed.
Smonsterneming vir diagnostiek word in die prosedure uitgevoerkantoor. Om bloed te neem, gebruik weggooibare proefbuise met 'n stof wat bloedstolling inhibeer. Aktiwiteite wat daarop gefokus is om die verspreiding van aansteeklike middels te voorkom, help om die toegang van 'n ander stam mikroörganismes van buite te vermy.
Bloed vir PCR van hepatitis C word in die oggend op 'n leë maag geneem. Die monster word onmiddellik na die laboratorium gestuur. Dit word toegelaat om die biomateriaal by 'n temperatuur van +4 tot +8 grade Celsius te stoor. Houers is gemerk en voorsien van aanwysings. Toetsuitslae is binne 48 uur beskikbaar, soms vroeër.
tipes PCR
Die toepassingsgebied van die polimerase-kettingreaksie is redelik wyd. Infeksiekundiges bepaal met behulp van PCR hepatitis B, siektes wat deur bloedsuiende insekte, vigs, tuberkulose oorgedra word. In onkologie, met behulp van hierdie metode, word tumorselle in 'n vroeë stadium opgespoor.
Daar is ongeveer veertien tipes ontleding. Die gebruik van een of ander tipe hang af van die omvang en finale resultate van die ontledings. Sommige tipes PCR is onontbeerlik waar die resultaat binne 20 minute benodig word.
Om hepatitis C te diagnoseer, word 3 tipes polimerase-kettingreaksie gebruik:
- Kwalitatiewe assessering kan óf positief wees, wat die teenwoordigheid van 'n infeksie in die liggaam aandui, óf negatief, wat die afwesigheid van 'n flavivirus aandui.
- Intydse PCR (kwantitatiewe analise) - bepaal die kwantitatiewe RNA van die patogeen in IE/ml.
- Genotipering is 'n analise wat die tipe (genotipe) van die virus openbaar.
Om die siekte akkuraat te identifiseer en te bepaal, gevolg deural drie tipes studies word gebruik om optimale terapie voor te skryf.
Kwalitatiewe polimerase-kettingreaksie-analise
'n Ontleding is verpligtend vir almal wat 'n ELISA het wat teenliggaampies teen HCV opgespoor het. Die kwalitatiewe PKR vir hepatitis C is die standaard vatbaarheidstoets. Die metode is slegs gemik op opsporing, geen telling of isolasie van ander stowwe word uitgevoer nie.
Om teenliggaampies op te spoor, word spesiale toetsstelsels gebruik met 'n sensitiwiteitsdrempel van minstens 50 IE/ml. As teenliggaampies opgespoor word, word ander verhelderende toetse voorgeskryf. As die resultaat negatief is, sal geen verdere toetsing gedoen word nie.
In sommige gevalle kan 'n vals negatiewe resultaat wees as gevolg van onbevoegde laboratoriumpersoneel of swak kwaliteit reagense. Vir versekering is dit beter om die ontleding elders oor te neem.
Kwantitatiewe PCR
Die metode word gebruik om die aantal flavivirus in een reaksiesiklus direk te bestudeer. Vir akkurate meting word DNS-fragmente wat vir hibridisasie gebruik word of fluoresserend gemerkte primers gebruik. Daar is 'n ekonomiese opsporing-opsie wat die SYBL Green kleurstof gebruik. Die kleurstof is in 'n klein groef in die DNA ingewig en word blou wanneer dit met 'n laser bestraal word.
Konsentrasie word bepaal deur die apparaat-versterker in digitale ekwivalent. Waardes kan effens verskil tussen laboratoriums en moet dus met verwysingswaardes vergelyk word.
Kwantitatiewe PCRhepatitis C help om die optimale dosis medisyne te kies en die duur van terapie te bepaal. Die frekwensie van die studie hang af van die stadium van die siekte, die tipe genotipe en die voorgeskrewe verloop van behandeling.
Genotipe-bepaling
Die hepatitis C-virus het 'n veranderlike genetiese samestelling. Talle wysigings maak dit onmoontlik om 'n entstof te skep, en bemoeilik ook terapie. Altesaam 11 genotipes en 100 subtipes is geïdentifiseer en aangeteken. In die lande van die voormalige USSR, by persone wat met hepatitis C besmet is, bespeur PCR hoofsaaklik genotipes 1b en 3.
In die teenwoordigheid van enige van die genotipes kan sirrose of lewerkanker baljaar. Daarom is dit so belangrik om die virus betyds op te spoor.
Vir sommige pasiënte is sekere middels wat ontwerp is om HCV te beveg, giftig. Genotipering stel jou in staat om die tipe proteïen te bepaal en 'n effektiewe middel voor te skryf.
In die resultate van tiktoetse is daar 'n nommer met 'n klein Latynse letter wat die genotipe van die virus aandui. As HCV opgespoor word, maar nie getik nie, beteken dit dat die persoon 'n genotipe het wat nie tipies is vir 'n sekere geografiese gebied nie.
ontledingresultate
Die dokter hanteer die ontsyfering van die resultate. Slegs data van verskeie studies (tesame met anamnese en ondersoek) kan 'n algehele werklike prentjie van die mediese geskiedenis gee.
- In 'n gesonde persoon bespeur 'n toets vir 'n kwalitatiewe reaksie in die biomateriaal niks nie. As die waarde "bespeur" aangedui word, word die infeksie bevestig, en die pasiëntbenodig verdere diagnose gevolg deur behandeling.
- Bepaling van die aantal aansteeklike middels maak dit moontlik om die viruslading op die liggaam te bepaal. Normaalweg spoor hepatitis C kwantitatiewe PCR nie die patogeen op nie. 'n Aanwyser van tot 810^5 word as 'n lae lading beskou en, met behoorlike terapie, waarborg 'n gunstige uitkoms. Hoër waardes vereis in-diepte ondersoek en vasstelling van langtermyn terapie, vir die positiewe uitkoms waarvan niemand kan instaan nie.
- Positiewe genotiperingsresultate dui aan watter genotipe herken word. 'n Negatiewe resultaat dui óf die afwesigheid van 'n flavivirus aan óf die teenwoordigheid van 'n genotipe wat nie tipies vir hierdie streek is nie.
Wat dui 'n positiewe PCR-toets aan
Enige ernstige siekte vereis 'n omvattende diagnose. 'n Positiewe hepatitis C PKR bevestig die diagnose, maar voorspellings kan slegs gemaak word na bykomende laboratorium- en instrumentele studies.
Opsporing van 'n virus gee nie 'n volledige beeld van die patologie nie. Dit is nodig om die tipe en aard daarvan te identifiseer, om te bepaal hoe dit die lewer en ander organe beïnvloed. Vroeë opsporing van HCV het dikwels 'n gunstige terapeutiese uitkoms.
Negatiewe PCR met positiewe ELISA
Wanneer die simptome wat kenmerkend van lewerskade waargeneem word, is daar 'n groot waarskynlikheid dat die infeksie reeds die liggaam binnegedring het. Daarom moet u 'n hepatoloog of 'n spesialis in aansteeklike siektes kontak. Tydens die onderhoude sal die spesialis 'n anamnese insamel en die nodige ondersoek voorskryf.
Ifdie resultate van studies oor hepatitis C PCR is negatief, en die ensiem-immunotoets is positief, dit dui op die teenwoordigheid van teenliggaampies teen die flavivirus in die bloed. Dit gebeur gewoonlik wanneer die infeksie die liggaam in 'n klein hoeveelheid binnedring, sodat die immuunstelsel dit op sy eie hanteer het. Maar sulke mense word steeds as besmet beskou en moet elke 6 maande ondersoek word. Indien, met sulke toetsuitslae, 'n persoon 'n gratis mediese ondersoek geweier word, is dit beter om 'n PCR te neem teen 'n fooi om gesondheid te handhaaf, en as die resultate positief is, kontak 'n spesialis vir diagnose en behandeling.
Voor- en nadele van die metode
Wanneer die diagnose van hepatitis C vasgestel word, hou PCR verskeie voordele in:
- Vroeë opsporing van patogeen.
- Akkurate definisie van die virus.
- Doeltreffendheid van diagnostiek.
- Minimum foutkoers.
- Hoë sensitiwiteit.
Nadele van die metode:
- Hoë koste van ontleding. Die toets vereis duur toerusting, reagense en hoogs gekwalifiseerde mediese personeel. Alles saam is 'n aansienlike bedrag.
- Streng vereistes vir die vervoer van biomateriaal.
Behandeling van inflammasie van die lewer
PCR-analise vir hepatitis C-virus word as fundamenteel vir diagnose beskou, maar nie definitief nie. Vir die terapie om effektief te wees, word 'n aantal bykomende laboratorium- en instrumentele studies vereis. Na verby aldiagnostiese maatreëls wat die dokter behandeling voorskryf:
- Dieet 5 word voorgeskryf.
- Alkohol is heeltemal uitgesluit.
- Gesamentlike ontvangs van Interferon en Ribavirin vir 25 dae.
- Kursusse van hepaprotectors "Essentiale", "Karsil", "Phosphogliv".
- In spesiale gevalle word diskrete plasmaferese gebruik.
Medisyne wat deur 'n hepatoloog voorgeskryf word, word gereeld gebruik, sonder om die dosis te verander. Die duur van die neem van die middels word deur die dokter bepaal nadat die kontroletoetse geslaag is. Nadat u die terapie voltooi het, moet u elke ses maande die dokter besoek.
PCR-diagnostiek maak dit moontlik om die veroorsakende middel van hepatitis C op 'n vroeë stadium te identifiseer. Dit dra by tot die doeltreffendheid van terapie en die voorkoming van die oorgang van die siekte in sulke gevaarlike vorms soos sirrose en hepatosellulêre karsinoom.
