Laboratoriumdiagnose van byna alle aansteeklike siektes is gebaseer op die opsporing van teenliggaampies in die pasiënt se bloed, wat teen die patogeen se antigene geproduseer word, deur die metodes van serologiese reaksies. Hulle het die mediese praktyk betree vanaf die laat negentiende tot vroeë twintigste eeu.
Die ontwikkeling van wetenskap het gehelp om die antigeniese struktuur van mikrobes en die chemiese formules van hul gifstowwe te bepaal. Dit het dit moontlik gemaak om nie net terapeutiese, maar ook diagnostiese sera te skep. Hulle word verkry deur verswakte patogene aan laboratoriumdiere toe te dien. Na 'n paar dae se blootstelling word die bloed van hase of muise gebruik om voorbereidings voor te berei wat gebruik word om mikrobes of hul gifstowwe te identifiseer deur serologiese toetse te gebruik.
Die eksterne manifestasie van so 'n reaksie hang af van die toestande van die instelling daarvan en van die toestand van antigene in die pasiënt se bloed. As mikrobiese deeltjies onoplosbaar is, presipiteer, liseer, bind of immobiliseer hulle in die serum. As die antigene oplosbaar is, dan verskyn die verskynsel van neutralisasie of presipitasie.
Agglutinasiereaksie (RA)
Die serologiese agglutinasietoets is hoogs spesifiek. Dit is maklik om uit te voer en redelikvisueel, om vinnig die teenwoordigheid van antigene in die pasiënt se bloedserum te bepaal. Dit word gebruik om die Vidal-reaksie (diagnose van tifus- en paratifuskoors) en Weigl (tifuskoors) te toets.
Dit is gebaseer op 'n spesifieke interaksie tussen menslike teenliggaampies (of agglutiniene) en mikrobiese selle (agglutenogene). Na hul interaksie word deeltjies gevorm wat neerslaan. Dit is 'n positiewe teken. Lewende of doodgemaakte mikrobiese middels, swamme, protosoë, bloedselle en somatiese selle kan gebruik word om die reaksie op te stel.
Chemies word die reaksie in twee stappe verdeel:
- Spesifieke verbinding van teenliggaampies (AT) met antigene (AG).
- Nie-spesifiek - neerslag van AG-AT-konglomerate, dit wil sê die vorming van agglutinaat.
Indirekte agglutinasiereaksie (IPHA)
Hierdie reaksie is meer sensitief as die vorige een. Dit word gebruik om siektes te diagnoseer wat veroorsaak word deur bakterieë, intrasellulêre parasiete en protosoë. Dit is so spesifiek dat selfs baie lae konsentrasies teenliggaampies opgespoor kan word.
Gesuiwerde skaap-eritrosiete en menslike rooibloedselle wat vooraf met teenliggaampies of antigene behandel is, word vir die produksie daarvan gebruik (na gelang van wat die laboratoriumtegnikus wil vind). In sommige gevalle word menslike rooibloedselle met immunoglobuliene behandel. Serologiese reaksies van eritrosiete word beskou as plaasgevind het as hulle op die bodem van die buis gevestig het. Oor 'n positiewe reaksiesê wanneer die selle gerangskik is in die vorm van 'n omgekeerde sambreel, wat die hele bodem beslaan. 'n Negatiewe reaksie word getel as die eritrosiete in 'n kolom of in die vorm van 'n knoppie in die middel van die bodem gevestig het.
Neerslagreaksie (RP)
Serologiese reaksies van hierdie tipe word gebruik om uiters klein deeltjies antigene op te spoor. Dit kan byvoorbeeld proteïene (of dele daarvan), verbindings van proteïene met lipiede of koolhidrate, dele van bakterieë, hul gifstowwe wees.
Sera vir die reaksie word verkry deur diere, gewoonlik konyne, kunsmatig te besmet. Met hierdie metode kan jy absoluut enige presipiterende serum kry. Die instelling van serologiese neerslagreaksies is soortgelyk in werkingsmeganisme as agglutinasiereaksies. Teenliggaampies wat in die serum voorkom, kombineer met antigene in 'n kolloïdale oplossing, wat groot proteïenmolekules vorm wat op die onderkant van die buis of op die substraat (gel) neergelê word. Hierdie metode word as hoogs spesifiek beskou en kan selfs onbeduidende hoeveelhede van 'n stof opspoor.
Word gebruik om plaag, tularemie, miltsiekte, meningitis en ander siektes te diagnoseer. Boonop is hy betrokke by 'n forensiese mediese ondersoek.
Gel-neerslagreaksie
Serologiese reaksies kan nie net in 'n vloeibare medium uitgevoer word nie, maar ook in agargel. Dit word die diffuse neerslagmetode genoem. Met sy hulp word die samestelling van komplekse antigeenmengsels bestudeer. Hierdie metode is gebaseer op die chemotaxis van antigene teen teenliggaampies en omgekeerd. In 'n jel beweeg hulleteen verskillende snelhede na mekaar toe en, ontmoet, vorm neerslaglyne. Elke reël is een stel AG-AT.
Eksotoksienneutralisasiereaksie met antitoksien (PH)
Antitoksiese serums is in staat om die werking van eksotoksien wat deur mikroörganismes geproduseer word, te neutraliseer. Hierdie serologiese reaksies is hierop gebaseer. Mikrobiologie gebruik hierdie metode om sera, gifstowwe en toksoïede te titreer en hul terapeutiese aktiwiteit te bepaal. Die krag van toksienneutralisasie word bepaal deur konvensionele eenhede - AE.
Boonop, danksy hierdie reaksie, is dit moontlik om die spesie of tipe eksotoksien te bepaal. Dit word gebruik in die diagnose van tetanus, witseerkeel, botulisme. Die studie kan beide "op glas" en in gel uitgevoer word.
Reaksie van lysis (RL)
Immunserum, wat die pasiënt se liggaam binnedring, het, benewens sy hooffunksie van passiewe immuniteit, ook liserende eienskappe. Dit is in staat om mikrobiese middels, sellulêre vreemde elemente en virusse wat die pasiënt se liggaam binnedring, op te los. Afhangende van die spesifisiteit van die teenliggaampies wat in die serum ingesluit is, word bakteriolisiene, sitolisiene, spirogetolisiene, hemolisiene en ander geïsoleer.
Hierdie spesifieke teenliggaampies word "komplement" genoem. Dit word in byna alle menslike liggaamsvloeistowwe aangetref, het 'n komplekse proteïenstruktuur en is uiters sensitief vir temperatuurstyging, skudding, sure en direkte sonlig. Maar in die gedroogde toestand is dit in staat om te behousy lyserende eienskappe tot ses maande.
Daar is hierdie tipe serologiese reaksies van hierdie tipe:
- bakteriolise;
- hemolise.
Bakteriolise word uitgevoer met behulp van die pasiënt se bloedserum en spesifieke immuunserum met lewende mikrobes. As genoeg komplement in die bloed aanwesig is, sal die navorser sien hoe die bakterieë ontbind, en die reaksie sal as positief beskou word.
Die tweede serologiese reaksie van die bloed is dat 'n suspensie van die pasiënt se rooibloedselle behandel word met serum wat hemolisiene bevat, wat slegs in die teenwoordigheid van 'n sekere kompliment geaktiveer word. As daar een is, neem die laboratoriumassistent die ontbinding van rooibloedselle waar. Hierdie reaksie word wyd in moderne medisyne gebruik om die komplementtiter (dit is die kleinste hoeveelheid wat eritrosietlise uitlok) in bloedserum te bepaal en om 'n analise vir komplementfiksasie uit te voer. Dit is op hierdie manier dat 'n serologiese toets vir sifilis uitgevoer word - die Wasserman-reaksie
komplementfikseringsreaksie (CFR)
Hierdie reaksie word gebruik om teenliggaampies teen 'n aansteeklike middel in die pasiënt se bloedserum op te spoor, asook om die patogeen deur sy antigeenstruktuur te identifiseer.
Tot op hierdie stadium het ons eenvoudige serologiese reaksies beskryf. RSK word as 'n komplekse reaksie beskou, aangesien nie twee nie, maar drie elemente daarin interaksie het: teenliggaampies, antigeen en komplement. Die essensie daarvan lê in die feit dat die interaksie tussen die teenliggaam en antigeenkom slegs voor in die teenwoordigheid van komplementproteïene, wat op die oppervlak van die gevormde AG-AT-kompleks geadsorbeer word.
Die antigene self, na komplementbyvoeging, ondergaan beduidende veranderinge, wat die kwaliteit van die reaksie toon. Dit kan lise, hemolise, immobilisasie, bakteriedodende of bakteriostatiese werking wees.
Die reaksie self vind in twee fases plaas:
- Vorming van 'n antigeen-teenliggaamkompleks wat nie visueel vir die ondersoeker sigbaar is nie.
- Verandering in die antigeen onder die werking van komplement. Hierdie fase kan meestal met die blote oog opgespoor word. As die reaksie nie visueel sigbaar is nie, word 'n bykomende aanwyserstelsel gebruik om veranderinge te identifiseer.
Aanwyserstelsel
Hierdie reaksie is gebaseer op komplementfiksasie. Gesuiwerde ram-eritrosiete en komplementvrye hemolitiese serum word 'n uur nadat die RSC gestel is, by die proefbuis gevoeg. As 'n ongebonde komplement in die proefbuis agterbly, sal dit by die AG-AT-kompleks wat tussen skaapbloedselle en hemolisien gevorm word, aansluit en dit laat oplos. Dit sal beteken dat RSK negatief is. As die eritrosiete ongeskonde gebly het, is die reaksie dus positief.
Hemagglutinasietoets (RGA)
Daar is twee fundamenteel verskillende hemagglutinasiereaksies. Een van hulle is serologies, dit word gebruik om bloedgroepe te bepaal. In hierdie geval tree rooibloedselle in wisselwerking met teenliggaampies.
En die tweededie reaksie is nie van toepassing op serologiese nie, aangesien rooibloedselle reageer met hemagglutiniene wat deur virusse geproduseer word. Aangesien elke patogeen slegs op spesifieke eritrosiete (hoender, lam, aap) inwerk, kan hierdie reaksie as hoogs spesifiek beskou word.
Jy kan sien of 'n reaksie positief of negatief is deur die ligging van die bloedselle aan die onderkant van die proefbuis. As hul patroon soos 'n omgekeerde sambreel lyk, is die gewenste virus in die pasiënt se bloed teenwoordig. En as al die eritrosiete soos 'n muntkolom gevorm het, dan is daar geen gewenste patogene nie.
Hemagglutinasie-inhibisietoets (HITA)
Dit is 'n hoogs spesifieke reaksie wat jou toelaat om die tipe, tipe virusse of die teenwoordigheid van spesifieke teenliggaampies in die pasiënt se bloedserum te bepaal.
Die kern daarvan lê in die feit dat die teenliggaampies wat saam met die toetsmateriaal by die proefbuis gevoeg word die afsetting van antigene op eritrosiete voorkom, en sodoende hemagglutinasie stop. Dit is 'n kwalitatiewe teken van die teenwoordigheid in die bloed van spesifieke antigene vir die spesifieke virus wat gesoek word.
Immunofluoressensiereaksie (RIF)
Die reaksie is gebaseer op die vermoë om AG-AT-komplekse met fluoresserende mikroskopie op te spoor na hul behandeling met fluorochroomkleurstowwe. Hierdie metode is maklik om te hanteer, vereis nie isolasie van suiwer kultuur nie en neem min tyd. Dit is onontbeerlik vir die vinnige diagnose van aansteeklike siektes.
In die praktyk word hierdie serologiese reaksies in twee tipes verdeel: direk en indirek.
Direkte RIF word vervaardig vanantigeen, wat vooraf met fluoresserende serum behandel is. En die indirekte een is dat die geneesmiddel eers behandel word met 'n konvensionele diagnostiek wat antigene bevat vir die teenliggaampies van belang, en dan word die luminescerende serum, wat spesifiek is vir die proteïene van die AG-AT-kompleks, weer toegedien, en mikrobiese selle word onder mikroskopie sigbaar.
