Onlangs is 'n betroubare, hoogs sensitiewe en vinnige metode ontwikkel om verskeie menslike aansteeklike siektes te diagnoseer. Hierdie metode word "PCR-analise" genoem. Wat is dit, wat is die essensie daarvan, watter mikroörganismes kan dit openbaar en hoe om dit korrek te neem, sal ons in ons artikel vertel.
Ontdekkinggeskiedenis
Het die polimerase kettingreaksie (PCR) metode uitgevind deur die Amerikaanse wetenskaplike Kary Mullis in 1983. Aanvanklik is die diagnostiese metode gepatenteer deur die Cetus Corporation, waarin die skepper daarvan gewerk het. Maar in 1992 is alle regte en patente aan Hoffman-La Roche verkoop. Daarna het dit geblyk dat soortgelyke studies parallel uitgevoer is en deur ander Amerikaanse bioloë, soos Alice Chen, David Edgar, John Trell, aangeteken is. In 1980 het die Sowjet-wetenskaplikes A. Slyusarenko, A. Kaledin en S. Gorodetsky ook hierdie probleem hanteer. Daarom was dit onmoontlik om die enigste kopiereghouer te bepaal. Baie prominente biochemici het 'n sekere bydrae gelewer tot die ontwikkeling van die polimerase-kettingreaksietegniek en het hul innovasies gepatenteer. Op die oomblik is die ontledingPCR word oral in spesiaal toegeruste laboratoriums uitgevoer.
Die kern van die PCR-diagnostiese metode
PCR-analise: wat is dit en hoe werk dit? Die essensie van die metode is om die volume van 'n sekere mikrobiese omgewing onder kunsmatige toestande te verhoog deur 'n spesiale DNA-polimerase-ensiem te gebruik. Hiervoor word die bestaande DNS-materiaal baie keer vermenigvuldig. Dus, in die teenwoordigheid van 'n patogene mikro-organisme in die monster, sal die hoeveelheid daarvan verhoog word as gevolg van biochemiese laboratorium manipulasies, en dit sal nie moeilik wees om die bakterie onder 'n mikroskoop op te spoor nie.
Hoe word materiële navorsing gedoen?
Vereis vir ontleding:
- DNA-matriks;
- primers wat die punte van 'n stuk materiaal verbind;
- hittebestande DNA-polimerase-ensiem;
- chemikalieë wat ensieme behoorlik laat werk;
- bufferoplossing wat nodig is om die gepaste toestande vir die groei en ontwikkeling van DNA-materiaal te skep.
Om PCR uit te voer, word 25-30 herhalings uitgevoer, bestaande uit drie stadiums: denaturering, uitgloeiing en verlenging.
Vir die ontleding van die polimeerkettingreaksie word 'n spesiale toestel gebruik - 'n versterker. Moderne toerusting laat jou toe om die nodige program vir verhitting en verkoeling van buise in te stel om foute tydens diagnostiek uit te skakel.
Waar word diagnostiek gebruik?
Die polimeerkettingreaksiemetode word in verskeie velde van medisyne gebruik:
- kriminaliste metdit identifiseer genetiese materiaal soos hare, speeksel of bloed;
- PCR-bloedtoets help met genotipering, byvoorbeeld om 'n individuele geneties inherente reaksie op 'n sekere geneesmiddel op te spoor;
- gebruik hierdie metode om die teenwoordigheid van familiebande tussen mense vas te stel;
- Die gewildste PCR-metode het in mediese diagnostiek geword om verskeie aansteeklike siektes te bepaal.
Watter infeksies bespeur PCR?
So, medisyne het lank en suksesvol PCR-analise gebruik. Wat dit is, weet ons reeds. En watter patogene kan daarmee opgespoor word? Die volgende aansteeklike siektes word deur PCR-metode gediagnoseer:
- hepatitis A, B, C;
- ureaplasmose;
- kandidiasis;
- chlamydia;
- mykoplasmose;
- gardnerellose;
- aansteeklike mononukleose;
- trichomoniasis;
- papilloomvirusinfeksie;
- tuberkulose;
- herpes infeksie tipes 1 en 2;
- helikobakteriose;
- cytomegalovirus;
- difterie;
- salmonellose;
- MIV-infeksie.
PKR-metodes word ook gebruik in die diagnose van kanker.
Metodevoordele
PCR-diagnostiek het verskeie voordele:
- Hoë sensitiwiteit. Selfs in die teenwoordigheid van slegs 'n paar molekules van mikroörganisme DNA, bepaal PCR-analise die teenwoordigheid van infeksie. Die metode sal help met chroniese en latent voorkomende siektes. Dikwels in sulke gevalle, die mikro-organismeis andersins onbewerkbaar.
- Enige materiaal is geskik vir navorsing, soos speeksel, bloed, genitale afskeidings, hare, epiteelselle. Die algemeenste is die ontleding van bloed en urogenitale smeer vir PCR.
- Geen langtermyn-oes benodig nie. Die outomatiese diagnostiese proses laat jou toe om die resultate van die studie na 4-5 uur te kry.
- Die metode is amper 100% betroubaar. Slegs geïsoleerde gevalle van vals negatiewe resultate is aangeteken.
- Die vermoë om verskeie tipes patogene uit 'n enkele materiaalmonster te identifiseer. Dit versnel nie net die proses om die siekte te diagnoseer nie, maar verminder ook materiaalkoste aansienlik. Dikwels skryf die dokter 'n omvattende PKR-analise voor. Die prys van die ondersoek, wat bestaan uit die bepaling van ses patogene, is ongeveer 1 500 roebels.
Aanbevelings vir voorbereiding vir ontleding
Om die resultate betroubaar te maak tydens die PCR-studie, moet jy die toets neem, volgens die aanbevelings vir voorlopige voorbereiding vir diagnose:
- Voordat jy speeksel skenk, moet jy 4 uur voor monsterneming daarvan weerhou om te eet en medisyne te neem. Spoel jou mond onmiddellik voor die prosedure uit met gekookte water.
- Bogenoemde reëls moet ook gevolg word wanneer 'n monster van die binneste oppervlak van die wang geneem word. Na spoel word dit aanbeveel om 'n ligte velmassering uit te voer om die afskeiding van die klier uit te lig.
- Uriene word gewoonlik by die huis afgehaal. Om dit te doen, moet jy 'n deeglike toilet uitvoergeslagsdele. Versamel 50-60 ml urine in 'n steriele plastiekhouer. Om die suiwerheid van die materiaal te verseker, word dit aanbeveel dat vroue 'n tampon in die vagina steek, en vir mans om die velvou so veel as moontlik terug te trek. Moenie gedurende jou tydperk skenk nie.
- Om sperm te skenk, moet jy vir 3 dae van seksuele omgang weerhou voor monsterneming. Dokters raai ook af om die sauna te besoek en 'n warm bad te neem, alkohol en gekruide kos te drink. Jy moet 3 uur voor die toets daarvan weerhou om te urineer.
- Om byvoorbeeld 'n urogenitale smeer te neem, as 'n PCR-toets vir chlamydia uitgevoer word, word beide vroue en mans aangeraai om seksuele rus vir 3 dae te hê. Antibakteriese middels moet nie 2 weke voor die ontleding geneem word nie. Vir 'n week moet jy ophou om intieme gels, salf, vaginale setpille, douching te gebruik. 3 ure voor die ondersoek moet u nie urineer nie. Tydens menstruasie word monsterneming nie uitgevoer nie, slegs 3 dae na die staking van bloedafskeiding kan u 'n urogenitale smeer neem.
PCR tydens swangerskap
Tydens die tydperk van verwagting van die baba is baie seksueel oordraagbare infeksies uiters gevaarlik vir die normale ontwikkeling van die fetus. SOS'e kan intrauteriene groeivertraging, miskraam of voortydige geboorte, aangebore misvormings van die kind uitlok. Daarom is dit uiters belangrik om 'n PKR-ondersoek in vroeë swangerskap te ondergaan. Dit is nodig om die ontleding te slaag met registrasie - tot 12 weke.
Die materiaal word met 'n spesiale kwas uit die servikale kanaal geneem. Die prosedure is pynloos en hou nie 'n gevaar vir die baba in nie. Gewoonlik word tydens swangerskap 'n ontleding vir chlamydia uitgevoer volgens die PCR-metode, sowel as vir ureaplasmose, mikoplasmose, sitomegalovirus, herpes, papillomavirus. So 'n kompleks van eksamens word PCR-6 genoem.
PCR vir MIV-diagnose
Weens die feit dat die polimerase-kettingreaksiemetode baie sensitief is vir veranderinge in die liggaam en die toestande van die diagnose, kan baie faktore die resultaat beïnvloed. Daarom is PCR-analise vir MIV-infeksie nie 'n betroubare metode nie, die doeltreffendheid daarvan is 96–98%. In die oorblywende 2-4% van die gevalle gee die toets vals positiewe resultate.
Maar in sommige situasies is MIV PCR-diagnostiek onontbeerlik. Dit word gewoonlik gegee aan mense met 'n vals-negatiewe ELISA-resultaat. Sulke aanwysers dui aan dat 'n persoon nog nie teenliggaampies teen die virus ontwikkel het nie en hulle kan nie opgespoor word sonder 'n veelvuldige toename in die getal nie. Dit is presies wat bereik kan word deur 'n PCR-bloedtoets uit te voer.
Hierdie diagnose is ook nodig vir kinders van die eerste lewensjaar wat uit 'n MIV-positiewe ma gebore is. Die metode is die enigste manier om die status van 'n kind betroubaar te bepaal.
PCR vir die diagnose van hepatitis
Die polimerase-kettingreaksiemetode maak dit moontlik om die DNA van die hepatitis A, B, C-virus op te spoor lank voor die vorming van teenliggaampies teen die infeksie of die aanvang van simptome van die siekte. PCR-analise vir hepatitis C is veral effektief, aangesien hierdie siekte in 85% van die gevalle asimptomaties is en sondertydige behandeling betree die chroniese stadium.
Tydige opsporing van die patogeen sal help om komplikasies en langtermynbehandeling te vermy.
Omvattende PCR-ondersoek
Komplekse PCR-analise: wat is dit? Dit is 'n ondersoek met behulp van die polimeriese kettingreaksiemetode, wat die bepaling van verskeie tipes infeksies gelyktydig insluit: mycoplasma genitalium, mycoplasma hominis, gardnerella vaginalis, candida, trichomonas, sitomegalovirus, ureaplasma urealiticum, herpes tipes 1 en 2, gonorree, papillomavirus. Die prys van sulke diagnostiek wissel van 2000 tot 3500 roebels. afhangende van die kliniek, die materiaal en toerusting wat gebruik word, sowel as die tipe analise: kwalitatief of kwantitatief. Wat nodig is in jou geval - die dokter sal besluit. In sommige gevalle is dit genoeg om net die teenwoordigheid van die patogeen te bepaal, in ander, byvoorbeeld, met MIV-infeksie, speel 'n kwantitatiewe titer 'n belangrike rol. Wanneer al die bogenoemde patogene gediagnoseer word, word die ondersoek "PCR-12-analise" genoem.
Transkripsie van ontledingsresultate
Om die PCR-analise te ontsyfer is nie moeilik nie. Daar is slegs 2 skale van die aanwyser - "positiewe resultaat" en "negatiewe resultaat". Wanneer 'n patogeen opgespoor word, kan dokters die teenwoordigheid van die siekte met 99% sekerheid bevestig en die pasiënt begin behandel. Met 'n kwantitatiewe metode om infeksie te bepaal, sal die ooreenstemmende kolom die numeriese aanwyser van opgespoorde bakterieë aandui. Slegs 'n dokter kan die omvang van die siekte bepaal en die nodige behandeling voorskryf.
In sommige gevalle, byvoorbeeld, wanneer MIV-infeksie deur PCR bepaal word, met 'n negatiewe resultaat, word dit nodig om bykomende ondersoeke uit te voer om die verkrygde aanwysers te bevestig.
Waar om getoets te word?
Waar om 'n PCR-toets af te lê: in 'n openbare kliniek of in 'n privaat laboratorium? Ongelukkig is die toerusting en metodes in munisipale mediese instellings dikwels verouderd. Daarom is dit beter om voorkeur te gee aan private laboratoriums met moderne toerusting en hoogs gekwalifiseerde personeel. Daarbenewens sal jy in 'n privaat kliniek baie vinniger resultate kry.
In Moskou bied baie private laboratoriums PCR-analise vir verskeie infeksies aan. Byvoorbeeld, in sulke klinieke soos Vita, Complex Clinic, Happy Family, Uro-Pro, word PCR-analise uitgevoer. Die prys van die eksamen is vanaf 200 roebels. vir die identifisering van een patogeen.
Daar kan tot die gevolgtrekking gekom word dat die diagnose van aansteeklike siektes deur PCR in die meeste gevalle 'n vinnige en betroubare manier is om die patogeen in die liggaam in die vroeë stadiums van infeksie op te spoor. Maar tog, in sekere gevalle, is dit die moeite werd om ander diagnostiese metodes te kies. Slegs 'n spesialis kan die behoefte aan so 'n studie bepaal. Om die PKR-analise te ontsyfer vereis ook 'n professionele benadering. Volg jou dokter se raad en moenie toetse neem wat jy nie nodig het nie.
